聚丙烯酰胺凝膠配置里面有很多的道道,一般人很少涉足,不管是步驟和注意事項(xiàng)都可能影響我們的配置成功幾率,所以,今天盛福萊給大家分享一下聚丙烯酰胺凝膠配置步驟及方法,供大家學(xué)習(xí):
聚丙烯酰胺凝膠配制步驟
1.按照要求組裝好垂直電泳版,兩塊玻璃般的底部用1.5%?瓊脂糖封邊,封邊應(yīng)嚴(yán)密,以免聚丙烯酰胺凝膠的膠液漏出。
2.分別量取配比用量的30%丙烯酰胺溶液、5×TBE和超純水置于100?ml燒杯中,用玻璃棒拌勻。
3.用微量加樣器加入配比用量的10%過(guò)硫酸銨溶液和TEMED,加入后聚合即開(kāi)始,迅速搖勻。
4.用玻璃棒引流,將混合液灌注于兩塊玻璃板之間,一次性完成灌膠過(guò)程,避免產(chǎn)生氣泡。
5.一次性平穩(wěn)插入樣梳,以形成點(diǎn)樣孔。
6.聚合后,向電泳槽中加入1×TBE緩沖液直至沒(méi)過(guò)點(diǎn)樣孔,且正負(fù)極槽內(nèi)緩沖液高度一致。
聚丙烯酰胺配制注意事項(xiàng)
聚丙烯酰胺易溶于冷水,分子量對(duì)溶解度影響不大,但高分子量的酰胺濃度超過(guò)質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%以后,會(huì)形成凝膠狀態(tài)。溶解溫度超過(guò)50度,PAM發(fā)生分子降解而失去助凝作用。因此溶解聚丙烯酰胺時(shí)要用45-50度的溫水最為適宜。
配制聚丙烯酰胺溶液一般配成質(zhì)量濃度為0.05-2%,陽(yáng)離子酰胺粘度較小,可配制成濃度較大的溶液,陰離子酰胺粘度較大,可適當(dāng)配制成濃度較小的溶液。配制溶液時(shí)不可濃度過(guò)大,否則不容易控制加藥量,容易造成加藥過(guò)量。聚丙烯酰胺的加入量很小,一般加藥量在0.1-2ppm。
聚丙烯酰胺溶液用于處理廢水時(shí),加藥后的絮凝效果與攪拌時(shí)間與攪拌有關(guān)。當(dāng)已經(jīng)形成大塊絮凝時(shí),就不要再繼續(xù)攪拌,否則會(huì)使已經(jīng)形成的較大礬花被打碎,變成細(xì)小的絮凝體,影響沉降效果。
總結(jié):所以大家在生產(chǎn)制備聚丙烯酰胺凝膠的時(shí)候,一定要嚴(yán)格按照正確的方法步驟來(lái)制備,這樣才能更好的確保制備成功率。